Factores que influyen en las técnicas de cultivo de tejido vegetal

Todas las células vegetales tienen una capacidad única: una sola célula puede crecer y dividirse bajo condiciones convenientes para regenerar una planta entera. Esta propiedad conocida como totipotencia, es la base de cultivo de tejidos vegetales. Cultivo de tejidos vegetales se refiere al procedimiento en el cual células o tejidos crecen separados de la planta. Sin embargo, esto no es tan simple como recoger una parte de la planta y crece en un tubo de ensayo; varios factores afectan el proceso entero, y estos deben ser controlados.

Medios de cultivo

El crecimiento de los cultivos tiene lugar en los medios de cultivo específicos. En general, estos medios deben tener una composición que proporciona los nutrientes necesarios y factores de crecimiento en la proporción correcta. Medios de cultivo se compone de ciertos nutrientes inorgánicos principales como nitrógeno, fósforo, potasio, calcio, magnesio y azufre. Oligoelementos como el boro, cobre, manganeso, cobalto, yodo y sodio son necesarios para apoyar el crecimiento sano y saludable. Cultivos de tejido a menudo son heterótrofos y, por lo tanto, requieren una fuente de carbono. También necesitan el hierro para la síntesis de clorofila y las diferentes reacciones redox dentro de la cultura creciente. Reguladores de crecimiento como auxinas y citoquininas deben estar presentes en la proporción correcta para la raíz y disparar formación.

Fuente de explante

Varias partes de la planta pueden utilizarse como explantes para iniciar un cultivo de tejidos vegetales. Sin embargo, cada órgano de la planta difiere en su tasa de crecimiento y la regeneración porque las células de ese órgano existen en una determinada etapa de desarrollo. Órganos también difieren en su actividad metabólica y su capacidad para transportar y utilizar reguladores de crecimiento. En general, tejidos meristemáticas como la punta de la raíz, vástago de punta y punta auxiliar bud son explantes buenos porque muestran la tasa más rápida de la división celular. Además, estos tejidos tienen una mayor capacidad para la captación y concentración de reguladores de crecimiento. La carga microbiana de los explantes es también un factor importante y esto hace que la raíz tip más problemático que el brote o tallo consejos.

Ambiente estéril

El medio utilizado para el crecimiento de cultivos de tejidos vegetales proporciona las condiciones que son propicias para el crecimiento de microorganismos. Por lo tanto, es muy importante para conservar la esterilidad del medio. Autoclave de medios de cultivo antes de su uso, transfiriendo los tejidos en medios de cultivo bajo un flujo Laminar de aire gabinete y siguiendo técnicas asépticas debe ser estrictamente para un exitoso cultivo de tejidos. El agua utilizada para preparar el medio debe representar estéril a través de la destilación o la ósmosis inversa.

Condiciones ambientales

Varios factores ambientales afectan el crecimiento de cultivos de tejidos. Luz, por ejemplo, se inducen propiedades con intensidades óptimas varían entre especies. La temperatura debe mantenerse a un nivel que es el más conveniente para el crecimiento del callo. Otro factor a considerar es el pH del medio de cultivo, las condiciones altamente ácidas o alcalinas afectan negativamente la capacidad de la cultura de tomar nutrientes. La humedad relativa de la sala de cultura debería mantenerse entre 70 y 75 por ciento debido a valores más bajos de causan deshidratación del medio, mientras que niveles superiores fomentar la contaminación microbiana de las culturas.


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